目的
使用沃特世（Waters®）ACQUITY UPC-Squared™系统将药典中*含量的正相HPLC测定方法转换为超临界流体色谱（SFC）方法。
背景
目前，美国药典（USP）规定了含有*（4,4’-二氨基二苯砜，CAS#80-08-0）药物片剂的正相HPLC分析方法。使用4.0x300mm，10µm的硅胶柱（L3）进行等度分离，流动相为正己烷、异丙醇、乙腈和乙酸乙酯（7:1:1:1）的混合溶液。该方法的运行时间约为12.5min（zui后一个主峰出峰时间的2倍，流速1.5mL/min）。如大多数药典中的方法一样，本方法经过验
证且可靠。但是，该方法使用了正己烷和乙酸乙酯溶剂。出于健康、安全和环保的原因，许多实验室都想减少这些溶剂的使用。超临界液体色谱（SFC）是一种正相色谱分离技术，其使用CO2作为主流动相，以极性溶剂（如甲醇）作为改性剂。由于SFC的原理与HPLC的原理相似，因此，目前的方法应该能够转换成SFC方法，减少溶剂的消耗和处理，降低每次分析的成本，同时增强了健康、安全和环境方面的保护。转换成SFC的色谱方法必须保持数据质量，而且必须得到与目前正相色谱
方法一致的实验结果
对寻求更、更低成本的*片分析方法的实验室而言，ACQUITY UPC-Squared系统不愧为理想之选，该方法同时加强了健康、安全和环境方面的保护。
解决方案
使用目前美国药典（USP）方法，制备和分析*标准品和片剂样品，如图1所示（该样品也用于SFC分析）。使用目前USP方法的分析结果与使用ACQUITY UPC2方法得到的结果进行对比，如图2所示。
SFC方法的条件如下：
色谱柱：ACQUITY UPC 2BEH，3.0x50mm，1.7µm
柱温：45°C
流动相：85%CO2:15%MeOH
流速：3.0mL/min,
背压：130bar/1885psi
检测器：UV/PDA，254nm
药典方法所列出的适应性条件是zui低要求（相对标准偏差不得大于2%）。标准品6次重复进样，目前正相HPLC方法得到的保留时间和峰面积的相对标准偏差（%）分别为<0.1%，<1.1%。超合相色谱方法Ultra Performance Convergence Chromatography™（UPC-Squared）重复6次进样得到的实验结果符合USP药典系统适应性要求（保留时间RSD值0.8%，峰面积RSD值0.9%），且运行速度（1.75min）大大加快。两种方法测定片剂样品的分析结果高度一致。本例中，每次正相HPLC分析使用正己烷13.1mL，异丙醇、乙腈和乙酸乙酯各1.9mL。相比之下，UPC2方法仅消耗约0.50mL甲醇。这说明了通过将正相
色谱方法转换为UPC-Squared方法可以大大地减少有机溶液的使用。根据目前的溶剂价格，每次正相色谱HPLC分析成本大约为1.08美元；相比之下，UPC-Squared仅为0.01美元。
总结
使用ACQUITY UPC-Squared，可以成功地将美国药典的HPLC方法转换为UPC-Squared方法。这种新的UPC-Squared方法得到的数据与目前的HPLC方法相当，甚至更好；速度是目前的HPLC方法的7倍，并且消耗的溶剂更少。我们以更快的速度得到高品质的分析数据，则实验室生产率提高，每个样本的分析成本降低。ACQUITY UPC-Squared系统是实验室将目前的正相HPLC方法转换为更、更省钱的UPC-Squared的方法的一种理想的解决方案，同时也增强了健康、安全和环境方面的保护。
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