进入展台在线留言

欢迎联系我

有什么可以帮您？在线咨询

jQuery(document).ready(function () { var xwtkq = Vivian.GetCloseAppKfTalkToUserIDorCompanyID("","134864").value; if (xwtkq == "0") { jQuery("#Consultation").bind("contextmenu click",function () {ChangeTopHeight(0,985162,115065,134864); ); else{ jQuery("#Consultation").hide(); )

Thermo荧光分光光度计测量寡核苷酸的熔解温度

来源：浙江纳德科学仪器有限公司 2026年02月03日 07:12

function share(types) { var title, imageUrl, url, description, keywords; //获取文章标题 title = document.title; //获取隐藏域中的图片地址 try { imageUrl = document.getElementById("shareimg").innerHTML; catch (e) { imageUrl = ""; //假如图片为空获取网页中的第一张图片地址作为分享图 if (imageUrl == "") { try { imageUrl = document.images[0].src; catch (e) { imageUrl = ""; //获取当前网页url url = document.location.href; url = url.replace("html#", "html"); try { //获取网页描述 description = document.querySelector('meta[name="description"]').getAttribute('content'); catch (e) { description = ""; try { //获取网页关键字 keywords = document.querySelector('meta[name="keywords"]').getAttribute('content'); catch (e) { keywords = ""; //qq空间接口的传参 if (types == 'qzone') { window.open('https://sns.qzone.qq.com/cgi-bin/qzshare/cgi_qzshare_onekey?url=' + url + '&title=' + title + '&pics=' + imageUrl + '&summary=' + description); //新浪微博接口的传参 if (types == 'weibo') { window.open('http://service.weibo.com/share/share.php?appkey=583395093&url=' + url + '&title=' + title + '&pic=' + imageUrl); // //qq好友接口的传参 // if (types == 'qqim') { // window.open('http://connect.qq.com/widget/shareqq/index.html?url=' + url + '&title=' + title + '&pics=' + imageUrl + '&summary=' + description + '&desc=' + keywords); // //生成二维码给微信扫描分享 if (types == 'weixin' || types == 'qqim') { //在线二维码（服务器性能限制，仅测试使用，屏蔽非大陆ip访问） // url = url.replaceAll("-", "%2D"); url=url.replace(/-/g, '%2D') window.open('https://www.a-bm.cn/share.aspx?types=' + types + '&url=' + url);

生物材料由许多化学键组成，随着温度的升高，材料内能增加同时化学键断裂。这种因化学键断裂而导致生物材料结构改变的现象被称作热变性。此外，时的变性温度被称为熔解温度。熔解温度是用于表征材料稳定性的指标之一。

寡核苷酸是一种遗传物质，由多组碱基构成。寡核苷酸可以很容易地和它们的互补对链接，所以常用来作为探针确定DNA或RNA的结构，经常用于基因芯片、电泳、荧光杂交等过程中。

本实验采用Thermo Fisher公司的lumina荧光分光光度计配备 Peltier 温控系统对不同温度下的荧光性能进行了测量。Peltier温控系统可快速精准地对温度进行调节，温度范围可控制在-10℃到100℃。该系统有样品除霜功能、磁力搅拌功能和温控功能。本研究采用 Lumina 和 Peltier系统，结合荧光标记，研究了寡核苷酸荧光强度与温度的关系。根据一阶导数分析熔点曲线并计算出了TM 值。

如图1所示，我们将Alexa Fluor® 488 荧光探针标记在寡核苷酸的5? 端部，将Alexa Fluor® 532 荧光探针连接在另一端。

实验步骤

1.添加 10ml 的 Tris-EDTA 缓冲液（pH 8.0）到两根塑料管中，形成浓度分别为172mM（供体）和

190mM（受体）的NaCl溶液。

2.在上述缓冲液中溶解供体/受体寡核苷酸，使浓度变为900nM。

3.混合已制备的供体试剂和受体试剂，然后在室温下培养5分钟。

4.将Peltier系统安装在 Lumina上。

5.打开Luminous的Thermal软件，如图3输入预定参数。使用软件（Excel®, Origin®等）根据供体各测量点数据计算一阶导数，并在测查看TM 值。

实验结果

FRET 现象是供体到受体的一种能量转移现象，这是由于荧光物质受热前荧光探针间距离较短造成的。因此，在供体激发波长519nm处发出较弱的荧光，在受体的激发波长553nm处发出较强的荧光。另一方面，随着受热产生的热变性现象，与FRET现象相反。换句话说，荧光在519nm时较强，而在553nm时较弱.

如图5所示，我们绘制了供体、受体荧光强度与温度的关系。可以确认，供体和受体上发生的荧光强度逆转的情况是由于FRET 现象消失导致的。

目前有多种方法可以确定TM 值，本实验中我们通过一阶导数的峰值来确定TM 值。本次试验所用寡核苷酸的TM 值为49℃。（图6）

了解Thermo Fisher公司的lumina荧光分光光度计，详询Thermo荧光分光光度计省总代理浙江纳德科学仪器有限公司，详询电话：。

免责声明

凡本网注明“来源：九五至尊网站”的所有作品，均为浙江兴旺宝明通网络有限公司-九五至尊网站合法拥有版权或有权使用的作品，未经本网授权不得转载、摘编或利用其它方式使用上述作品。已经本网授权使用作品的，应在授权范围内使用，并注明“来源：九五至尊网站”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
本网转载并注明自其它来源（非九五至尊网站）的作品，目的在于传递更多信息，并不代表本网赞同其观点或和对其真实性负责，不承担此类作品侵权行为的直接责任及连带责任。其他媒体、网站或个人从本网转载时，必须保留本网注明的作品第一来源，并自负版权等法律责任。
如涉及作品内容、版权等问题，请在作品发表之日起一周内与本网联系，否则视为放弃相关权利。

九五至尊网站

Thermo荧光分光光度计测量寡核苷酸的熔解温度

免责声明